[摘要]目的：用气相色谱法测定头孢米诺钠中甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷四种有机溶剂的残留量。方法：采用毛细管气相色谱法，色谱柱为DB-624；载气为氮气；检测器为FID；按外标法计算含量。结果：在该色谱条件下，测得甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷残留溶剂均有良好的线性关系(r=0.998 0~0.999 6)；各平均回收率分别为95.3%、98.6%、98.9%、96.9%；各精密度的RSD分别为6.8％、2.7%、1.2％、2.2%；最低检测限分别为7.8、6.2、7.0、1.1 μg/ml。三批样品中上述有机溶剂残留量均符合要求。结论：该毛细管气相色谱法灵敏、准确、可靠，可用于该制剂中残留有机溶剂的测定。 
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　　[关键词]头孢米诺钠；气相色谱法；有机溶剂残留 
　　[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2007）11（a）-093-03 
　　 
　　头孢米诺钠是广州市白云山制药厂生产的第三代头孢类抗生素，对革兰阳性菌和革兰阴性菌有广谱抗菌活性，特别对大肠杆菌、克雷伯杆菌属、流感嗜血杆菌、变形杆菌属及脆弱拟杆菌有很强的抗菌作用。在生产过程中，常用甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷作为溶媒，因此在头孢米诺钠中残留有机溶剂是不可避免的。经对头孢米诺钠各项指标的检测发现，溶剂残留量的大小直接与药物的理化常数相关，如残留量过大则会造成头孢米诺钠的吸收系数、比旋度等指标不符合标准。留样观察实验也发现，溶剂残留量大小直接和药物的稳定性有关，残留量越大，则稳定性越低，造成头孢米诺钠在室温放置过程中发生溶液颜色变深、浊度升高等现象，直接影响产品的质量。ICH(人用药品注册技术要求国际协会)对药物中的残留溶剂也作了具体的规定[1]。为了生产出优质的产品，有必要对头孢米诺钠中的甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷的残留量进行测定，并在生产中严加控制。药物中残留有机溶剂的测定，大多采用气相色谱法[2]，而原操作方法是采用两个不同的操作系统，运用溶液直接进样的分析方法，操作很烦琐，而且对色谱系统有损害，检测的灵敏度很低，影响溶剂残留的检测。现采用该法测定，实验证明本法准确、重现性好，对生产中有机溶剂的残留起到了控制作用。 
　　 
　　1 仪器和试药 
　　 
　　1.1 仪器 
　　Agilent 6890N气相色谱仪；DANI HSS86.50顶空进样器。 
　　1.2 试药 
　　头孢米诺钠(广州白云山化学制药厂，批号为：061130010、061130020、061130030)；甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷对照品(色谱纯，天津康科德科技有限公司)；水为纯化水，经气相色谱检测对测定无干扰。 
　　 
　　2 方法与结果 
　　 
　　2.1 色谱条件 
　　2.1.1 顶空进样器条件平衡温度：60℃；进样系统操作温度：120℃；传输管温度：120℃；进样间隔时间：10 min；样品平衡时间：30 min。 
　　2.1.2 气相色谱条件色谱柱：DB-624；柱温：35℃；进样口温度：200℃；检测器温度：250℃；柱前压：2.5 psi；分流比：10∶1。 
　　2.2 溶液的制备 
　　2.2.1 空白溶液的制备取22 ml顶空瓶，加水2 ml，加盖，即得。 
　　2.2.2 供试品溶液的制备精密称取头孢米诺钠200 mg，置于22 ml顶空瓶中，加水2 ml，加盖，超声波溶解，即得。 
　　2.2.3 标准溶液的制备精密称取甲醇100 mg、乙醇100 mg、二氯甲烷200 mg、乙腈100 mg置50 ml量瓶中，加水稀释至刻度，从中取2 ml置50 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得标准溶液。 
　　2.3 系统适用性试验 
　　精密称取200 mg甲醇，200 mg乙醇，100 mg乙腈，100 mg二氯甲烷，置于同一100 ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，作为标准储备液。取1 ml对照品储备液到50 ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，作为对照测试液。取2 ml对照测试液置于22 ml顶空瓶中，加盖，60℃平衡30 min，作气相色谱分析，各峰分离良好。色谱图见图1。 
　　 
　　2.4 标准曲线的绘制 
　　取标准储备液配成甲醇的质量浓度分别为20、40、80、200、400 μg/ml的标准系列溶液。取不同浓度的标准系列溶液2 ml到22 ml顶空瓶中，加盖，做气相色谱分析，测定各自峰面积(Y)。以浓度（X）对其峰面积（Y）作线性回归，回归方程分别为：甲醇：Y=221.690 61X-1.305 47，r=0.999 1；乙醇：Y=411.458 17X-4.566 57，r=0.998 9；乙腈：Y=759.356 42X-2.778 44，r=0.999 6；二氯甲烷：Y=3 356.725 25X＋7.175 03，r=0.998 0。结果表明：甲醇、乙醇在2~40 μg/ml范围内呈良好的线性关系，乙腈、二氯甲烷在1~20 μg/ml范围内呈良好的线性关系。 
　　2.5 精密度试验 
　　精密称取200 mg甲醇、200 mg乙醇、100 mg乙腈、100 mg二氯甲烷于同一100 ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀。取1 ml至100 ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，作为精密度测试溶液。取2 ml精密度测试溶液置于22 ml顶空瓶中，加盖，60℃平衡30 min，作气相色谱分析，平衡试验5次。残留的甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷的RSD分别为6.8%、2.7%、1.2%、2.2%。见表1。 
　　 
　　2.6 检测限试验 
　　取1 ml精密度测试溶液置于25 ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，作为检测限测试溶液。取2 ml检测限测试溶液置于22 ml顶空瓶中，加盖，60℃平衡30 min，作气相色谱分析。调节检测灵敏度和进样量，信噪比为3∶1，使峰高为基线噪声的3倍左右。残留的甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷的检测限分别为7.8、6.2、7.0、1.1 μg/ml。 
　　2.7 回收率试验 
　　精密称取批号为061130010的头孢米诺钠200 mg，共5份，分别置于22 ml顶空瓶中，向瓶中分别加入20、40、80、200 、400 μg/ml的标准溶液2 ml，加盖溶解后做气相色谱分析，甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷的平均回收率分别为95.3%、98.6%、98.9%、96.9%，见表2~5。此方法各溶剂的回收率都在规定范围内，证明本法具有较好的准确度。 
　　 
　　2.8 样品的测定 
　　精密称取头孢米诺钠样品200 mg，置于22 ml顶空瓶中，加水2 ml，加盖，超声溶解后，做气相色谱处理。测出各批次残留情况见表6。 
　　 
　　3 讨论 
　　 
　　本方法用顶空进样技术分析头孢米诺钠中的残留溶剂，包括甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷，由于采用了顶空进样器，使分析准确、方便、重复性高。 
　　实验过程中对各色谱条件进行了优化，考虑到样品的热稳定性问题，设置样品的平衡温度为60℃，并且为了更好地分离丙酮、异丙醇和乙腈，把柱温设为35℃，柱前压为2.5 psi。 
　　《中国药典》2005年版二部对有机挥发性杂质的检查作出了规定，要求精密度RSD≤10%[3]。本方法连续进样5针，各对照品峰的RSD均小于7.0%，说明方法精密度符合《中国药典》的要求。最低检测限均＜10 μg，回收率也能满足要求。故本方法适用于头孢米诺钠四种有机溶剂的检测。 
　　 
　　[参考文献] 
　　[1]周海钧,陈镇生,郑竹莲,等.ICH药品注册的国际技术要求(质量部分)[M].北京:人民卫生出版社,2000.82. 
　　[2]陈日南.药物中有机溶剂残留量测定法评述[J].中国医药工业杂志,1997,28(6):275. 
　　[3]中华人民共和国国家药典委员会.中国药典[S].二部.北京:化学工业出版社,2005.附录59. 
　　（收稿日期：2007-09-03） 
　　 
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